Антинуклеарные антитела иммуноблот что это такое
Антинуклеарные антитела, иммуноблот (аутоантитела класса IgG к 14 различным антигенам: nRNP/Sm, Sm, SS-A (SS-A нативный и Ro-52), SS-B, Scl-70, Jo-1, PM-Scl, протеин B центромера, PCNA, dsDNA, нуклеосомы, гистоны, рибосомальный белок P, AMA-M2)
Описание
Антинуклеарные антитела, иммуноблот — показатель аутоиммунных заболеваний соединительной ткани.
Иммуноблот антинуклеарных антител
Иммуноблот антинуклеарных антител позволяет в одном тесте одновременно провести исследование 15 основных разновидностей антинуклеарных антител, что обеспечивает проведение дифференциальной диагностики основных системных ревматических заболеваний. Каждая разновидность аутоантител, выявляемая с помощью иммуноблота, обычно отмечается у пациентов с характерной клинической картиной, поэтому спектр аутоантител позволяет не только диагностировать заболевание, но и установить риск развития определенных клинических проявлений.
Иммуноблот антинуклеарных антител необходимо использовать на втором этапе серологического обследования при положительном результате других тестов, указывающих на присутствие в сыворотке обследуемого антинуклеарных антител.
Метод иммуноблота антинуклеарных антител в диагностике системных ревматических заболеваний характеризуется высокой клинической специфичностью. Отрицательный результат иммуноблота в этом случае не исключает диагноза системных ревматических заболеваний.
Основные заболевания, связанные с выявлением антинуклеарных антител (антигены выявляемые при иммуноблоте) :
Интерпретация результатов
Единицы измерения: качественный тест, результат представляют в форме «обнаружено» или «не обнаружено».
При обнаружении полосы, характеризующей наличие какого-либо вида антител, интенсивность окраски полосы дополнительно описывают количеством плюсов («крестов») для каждого из выявленных видов антител. Увеличение степени позитивности косвенно отражает содержание и аффинность аутоантител.
Референсные значения: антитела к Sm, RNP/Sm, SS-A (60 kДа), SS-A (52 кДа), SS-B, Scl-70, PM-Scl, PCNA, CENР-B, dsDNA, Histone, Nucleosome, Rib P, AMA-M2, Jo-1 не обнаружены.
Результат определения аутоантител представляется в «крестах» для каждого соответствующего антигена. Увеличение степени серопозитивности косвенно отражает содержание и аффинность аутоантител.
Варианты результата оценки серопозитивности приведены ниже:
Антинуклеарные антитела иммуноблот что это такое
Антитела к ядерным антигенам (ANA) – это гетерогенная группа аутоантител, направленных против компонентов собственных ядер. Они являются маркером аутоиммунных заболеваний и определяются для их диагностики, оценки активности и контроля за их лечением.
Антиядерные антитела, антинуклеарные антитела, антинуклеарный фактор, АНФ.
Antinuclear Antibody, ANA, Fluorescent Antinuclear Antibody, FANA, Antinuclear factor, ANF.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Как правильно подготовиться к исследованию?
Не курить в течение 30 минут до исследования.
Общая информация об исследовании
Антитела к ядерным антигенам (ANA) – это гетерогенная группа аутоантител, направленных против компонентов собственных ядер. Они выявляются в крови пациентов с разнообразными аутоиммунными заболеваниями, такими как системные заболевания соединительной ткани, аутоиммунный панкреатит и первичный билиарный цирроз, а также с некоторыми злокачественными новообразованиями. Исследование ANA используется в качестве скрининга аутоиммунных заболеваний у пациента с клиническими признаками аутоиммунного процесса (длительная лихорадка неясного генеза, суставной синдром, кожные высыпания, слабость и др.). Такие пациенты при положительном результате анализа нуждаются в дальнейшем лабораторном обследовании, включающем более специфичные для каждого аутоиммунного заболевания тесты (например, анти-Scl-70 при подозрении на системную склеродермию, антитела к митохондриям при подозрении на первичный билиарный цирроз). Следует отметить, что отрицательный результат исследования ANA не исключает наличия аутоиммунного заболевания.
ANA наиболее характерны для пациентов с системной красной волчанкой (СКВ). Они обнаруживаются у 98 % больных ею, что позволяет считать это исследование основным тестом для диагностики СКВ. Высокая чувствительность ANA в отношении СКВ означает, что повторные отрицательные результаты делают диагноз «СКВ» сомнительным. При этом отсутствие ANA полностью не исключает заболевания. У небольшой части больных ANA отсутствуют на момент появления симптомов СКВ, но возникают в течение первого года болезни. У 2 % больных антитела к ядерным антигенам не выявляются никогда. При отрицательном результате анализа у пациента с симптомами СКВ целесообразно провести более специфичные для СКВ лабораторные тесты, в первую очередь на антитела к двухцепочечной ДНК (анти-dsDNA). Выявление анти-dsDNA у пациента с клиническими признаками СКВ трактуется в пользу диагноза «СКВ» даже при отсутствии ANA.
СКВ возникает в результате комплекса иммунологических нарушений, развивающихся в течение длительного времени. Степень дисбаланса иммунной системы с течением болезни постепенно нарастает, что находит свое отражение в увеличении спектра аутоантител. Первый этап аутоиммунного процесса характеризуется наличием генетических особенностей иммунного ответа (например, определенных аллелей главного комплекса гистосовместимости, HLA) при отсутствии отклонений лабораторных исследований. На втором этапе в крови удается выявить аутоантитела, при этом клинических признаков СКВ нет. Антитела к ядерным антигенам, а также анти-Ro-, анти-La-, антифосфолипидные антитела наиболее часто выявляются на этом этапе. Обнаружение ANA ассоциировано с 40-кратным увеличением риска СКВ. Период между появлением ANA и развитием клинических симптомов бывает разным и составляет в среднем 3,3 года. Пациенты с положительным результатом анализа на ANA относятся к группе риска по развитию СКВ и нуждаются в периодическом наблюдении у ревматолога и в лабораторном обследовании. Третий этап аутоиммунного процесса характеризуется появлением симптомов болезни, при этом в крови удается обнаружить наиболее широкий спектр аутоантител, включая анти-Sm-антитела, антитела к двухцепочечной ДНК и рибонуклеопротеину. Таким образом, для получения полной информации о степени иммунологических нарушений при СКВ тест на ANA необходимо дополнять анализом на другие аутоантитела.
Течение СКВ варьируется от стойкой ремиссии до фульминантного люпус-нефрита. Чтобы дать прогноз заболевания, оценить его активность и эффективность лечения, используют различные клинические и лабораторные критерии. Так как ни один из тестов не позволяет однозначно предсказать обострение или поражение внутренних органов, мониторинг СКВ – это всегда комплексная оценка, включающая исследование ANA, а также других аутоантител и некоторых общеклинических показателей. На практике врач самостоятельно определяет набор тестов, наиболее точно отражающих, как изменяется течение заболевания у каждого пациента.
Особый клинический синдром представляет лекарственная волчанка. Она развивается на фоне приема некоторых лекарственных препаратов (чаще всего прокаинамида, гидралазина, некоторых ингибиторов АПФ и бета-блокаторов, изониазида, миноциклина, сульфасалазина, гидрохлортиазида и др.) и характеризуется симптомами, напоминающими СКВ. В крови большинства пациентов с лекарственной волчанкой также удается выявить ANA. При симптомах аутоиммунного процесса у пациента, принимающего эти препараты, рекомендуется анализ на ANA, чтобы исключить лекарственную волчанку. Особенность лекарственной волчанки заключается в исчезновении иммунологических нарушений и симптомов болезни после полной отмены препарата – в это время рекомендуется контрольное исследование ANA, и отрицательный результат подтверждает диагноз «лекарственная волчанка».
ANA выявляются у 3-5 % здоровых людей (в группе пациентов старше 65 лет эта цифра может достигать 10-37 %). Положительный результат у пациента без симптомов аутоиммунного процесса необходимо интерпретировать с учетом дополнительных анамнестических, клинических и лабораторных данных.
Для чего используется исследование?
Когда назначается исследование?
При симптомах аутоиммунного процесса: длительной лихорадке неясного генеза, болях в суставах, кожной сыпи, немотивированной утомляемости и др.
При симптомах системной красной волчанки (лихорадка, поражения кожи), артралгий/артрита, пневмонита, перикардита, эпилепсии, поражения почек.
Каждые 6 месяцев или чаще при обследовании пациента с диагнозом «СКВ».
При назначении прокаинамида, дизопирамида, пропафенона, гидралазина и других лекарственных препаратов, ассоциированных с развитием лекарственной волчанки.
Что означают результаты?
Референсные значения: отрицательно.
Причины положительного результата:
Причины отрицательного результата:
Что может влиять на результат?
Кто назначает исследование?
Ревматолог, дерматовенеролог, нефролог, педиатр, врач общей практики.
Антинуклеарные антитела (анти-Sm, RNP, SS-A, SS-B, Scl-70, PM-Scl, PCNA, CENT-B, Jo-1, к гистонам, к нуклеосомам, Ribo P, AMA-M2), иммуноблот
Специфичные аутоантитела к различным компонентам клеточного ядра, которые образуются при некоторых тяжелых аутоиммунных патологиях и имеют большое значение в диагностике системных ревматических заболеваний.
Для чего используется этот анализ?
Когда назначается анализ?
Специфичные АНА, антитела к экстрагируемым ядерным (нуклеарным) антигенам.
Синонимы английские
Antinuclear Antibodies (ANA) Comprehensive Profile, ANA-specific Antibodies, Extractable Nuclear Antigen Antibodies (ENA Panel).
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Как правильно подготовиться к исследованию?
Не курить в течение 30 минут до сдачи крови.
Общая информация об исследовании
Антинуклеарные антитела (АНА) к экстрагируемым ядерным антигенам представляют собой антитела к растворимым компонентам ядра клетки (рибонуклеопротеинам). В норме АНА отсутствуют в организме. При аутоиммунной патологии иммунная система начинает вырабатывать специфические иммуноглобулины к собственным клеткам и их компонентам.
Основной метод определения специфичности антител при положительном антинуклеарном факторе – это иммуноблотинг, позволяющий дифференцировать системные заболевания соединительной ткани. Данный метод исследования дает возможность одновременно выявить антитела к нескольким различным внутриклеточным антигенам, которые могут встречаться как сочетанно, так и изолированно.
Анти-Sm (Smith) – антитела к U1-, U2-, U4-рибонуклеопротеинам – специфичны для системной красной волчанки (СКВ). Они редко встречаются при других системных заболеваниях соединительной ткани и являются одним из критериев диагностики СКВ. При этом, однако, концентрация анти-Sm не коррелирует с активностью системной красной волчанки.
Антитела к антигенам RNP (anti-ribonucleoprotein) – это антитела к белковым компонентам малого ядерного нуклеотида – U-1-РНК. Они обнаруживаются при смешанных заболеваниях соединительной ткани (синдроме Шарпа), реже при системной красной волчанке и других ревматических заболеваниях.
Антитела к SS-A (Ro) направлены на белки, связанные с РНК Y1-Y5 в составе сплайсосомы. Эти антитела наиболее часто обнаруживаются при синдроме Шегрена и системной красной волчанке. При СКВ их продукция ассоциируется с определенным набором клинических проявлений и лабораторных нарушений: светочувствительностью, синдромом Шегрена, гиперпродукцией ревматоидного фактора. Присутствие анти-SS-A-антител в крови беременной женщины связано с высоким риском развития неонатального волчаночного синдрома у ребенка.
Анти-SS-B(La)-антитела к белку, связанному с РНК-полимеразой-3, выявляются при болезни Шегрена и в начальном периоде системной красной волчанки, развивающейся в пожилом возрасте и ассоциирующейся с низкой частотой развития нефрита.
Антитела к Scl-70 (антисклеродермальные антитела с молекулярной массой 70 кДа, антитела к топоизомеразе I) чаще появляются при диффузной (40 %), реже при ограниченной (20 %) форме системной склеродермии, CREST-синдроме. Они высокоспецифичны для склеродермии и являются плохим прогностическим признаком относительно развития легочного фиброза.
Антитела anti-PM/Scl – специфический серологический маркер для подгруппы больных склеродермией (Scl), полимиозитом (PM) и особенно для тех, у кого наблюдается совокупность симптомов обоих заболеваний (PM/Scl).
Антитела к ядерному антигену пролиферирующих клеток (PCNA) – один из высокоспецифичных тестов для выявления системной красной волчанки.
Антицентромерные антитела (анти-CENT-B) обнаруживаются у больных склеродермией, системной красной волчанкой и ревматоидным артритом. У больных системной склеродермией выявление данных антител указывает на благоприятный прогноз и низкую вероятность поражения внутренних органов.
Анти-Jo-1-антитела (антитела к гистидин-тРНК-синтетазе) впервые были обнаружены в сыворотке крови больных миозитом. У большинства больных с повышенным уровнем антисинтетазных антител выявляется интерстициальная болезнь легких, феномен Рейно. Данное исследование может быть использовано как прогностический маркер прогрессирования болезни.
Антитела к гистонам представляют собой одну из разновидностей антитуклеарных антител и определяются в основном при системной красной волчанке, являясь ее ранними маркерами.
Антитела к нуклеосомам – чувствительный маркер системной красной волчанки. Они определяются исключительно при СКВ, нередко осложненной поражением почек (люпус-нефритом).
АТ к рибосомальному белку Р (Ribo P) встречаются у 10-20 % больных с СКВ. Они взаимодействуют с фосфоропротеинами рибосом и встречаются преимущественно у больных СКВ с поражением центральной нервной системы, почек и печени. Их обнаружение специфично для СКВ, протекающей с волчаночным психозом.
Анти-AMA-M2 – антитела к антигенам митохондрий М-2, расположенным на внутренней мембране органеллы в виде комплекса ферментов. Данные антитела синтезируются при первичном билиарном циррозе и указывают на его тяжелое течение.
Некоторые разновидности АНА встречаются при одном заболевании или при перекрестных синдромах. Например, антитела к SS-A и SS-B или к RNP и Sm-антигенам часто выявляются совместно, поскольку входят в один белковый комплекс, выступающий антигеном для данных типов аутоантител.
Для чего используется исследование?
Когда назначается исследование?
Что означают результаты?
Референсные значения: отрицательно.
Причины повышения специфичных АНА
Антитела к гистонам
Антитела к нуклеосомам
Что может влиять на результат?
Кто назначает исследование?
Литература
Подписка на новости
Оставьте ваш E-mail и получайте новости, а также эксклюзивные предложения от лаборатории KDLmed
Антинуклеарные антитела
Что такое «Антинуклеарные антитела»?
Антинуклеарные антитела (АНА) — это группа аутоантител (антител к своим собственным тканям), которые реагируют с компонентами ядер клеток. Известно более 100 видов этих антиядерных антител, по структуре они относятся к белкам класса иммуноглобулинов: IgG, IgM, IgA.
Антитела вырабатываются к нуклеиновым кислотам и различным растворимым белковым компонентам ядра: гистонам, мембране ядра, сплайсосомам, ядрышкам, центромерам и рибонуклеопротеинам.
Заболевания, при которых иммунная система реагирует на свои белки, как на чужеродные, называются аутоиммунными патологиями. Тест на антиядерные антитела назначается для их диагностики. АНА находят более, чем у 90% больных системной красной волчанкой, рассеянным склерозом, аутоиммунным гепатитом, аутоиммунным панкреатитом, первичным билиарным циррозом и другими системными заболеваниями соединительной ткани.
Большинство антинуклеарных антител образуются в ответ на разрушение клеток, когда компоненты ядер становятся доступными для распознавания иммунной системой. В норме этого не происходит, так как иммунные клетки (макрофаги) уничтожают только разрушенные клетки и не передают информацию о них лимфоцитам.
Соединение «антитело и антиген» (компонент ядра) называется иммунным комплексом. Эти комплексы откладываются в стенках сосудов и тканях органов (кожа, почки, мозг, суставные поверхности и др.), что вызывает воспалительную реакцию и повреждение тканей.
В некоторых случаях антинуклеарные антитела образуются при разрушении клеток из-за другой болезни (опухоли, инфекции) или под действием ряда лекарственных препаратов. Но обычно количество таких антител низкое и они не долго циркулируют в крови.
Как подготовиться к анализу
Для исследования на АНА нужна венозная кровь.
Правила подготовки к исследованию:
Показания для назначения анализа
Рекомендовать анализ АНА врач может при:
Значение результатов анализа
Тест на антинуклеарные антитела проводится в виде:
При скрининговом исследовании положительный результат говорит о наличии у пациента какого-то заболевания соединительной ткани. Этот тест проводится при первичном обращении пациента. При отрицательном результате полностью исключить аутоиммунный процесс невозможно.
Иммуноблотинг показывает, какие виды антител преобладают, их сочетания. Такое исследование крови более сложное и дорогостоящее, но оно помогает точнее установить причину роста АНА в крови.
О чем говорит появление антинуклеарных антител в организме
Наличие антинуклеарных антител указывает на развитие в организме аутоиммунных патологий:
Менее выраженное повышение антинуклеарных антител характерно для:
Иммуноблот антинуклеарных антител
Описание
Синонимы (rus): Антинуклеарные антитела, специфичные АНА, антитела к экстрагируемым ядерным антигенам, антитела к экстрагируемым нуклеарным антигенам, анти-Sm, RNP, SS-A, SS-B, Scl-70, PM-Scl, PCNA, dsDNA, CENT-B, Jo-1, к гистонам, к нуклеосомам, Ribo P, AMA-M2
Синонимы (eng): ANA, ANA profile, antinuclear antibodies comprehensive profile, ANA-specific antibodies, anti-Sm, RNP, SS-A, SS-B, Scl-70, PM-Scl, PCNA, dsDNA, CENT-B, Jo-1, histone, nucleosome, Ribo P, AMA-M2
Биоматериал: Венозная кровь
Показатель(и): Антитела к антигенам: Sm, RNP/Sm, SS-A (60 kДа/52 кДа), SS-B, Scl-70, PM-Scl, PCNA, CENT-B, Jo-1, dsDNA/гистоны/, нуклеосомы, Ribo P, AMA-M2
Метод(и): Иммуноблот
Тип контейнера и особенности преаналитики: Биохимическая пробирка с активатором свертывания,6 мл (красная или коричневая крышечка)
Антинуклеарные антитела являются характерным маркером для диффузных заболеваний соединительной ткани, аутоиммунных заболеваний печени и некоторых других болезней. Это семейство антител, связывающее рибонуклеиновые кислоты, а также белки, с ними взаимодействующие. На данный момент известно около 200 аутоантител этого семейства, однако в клинической лабораторной диагностике оправдано определение лишь наиболее распространенных из них. Благодаря иммуноблоту антинуклеарных антител есть возможность одновременного исследования 15 антител данного семейства. Поскольку каждое антитело характерно для какого-либо одного или нескольких заболеваний, возникает возможность дифференциальной диагностики внутри группы аутоиммунных болезней. Кроме того, определённые антитела могут отвечать за развитие определенной клинической картины внутри единой нозологической единицы. Таким образом, обнаружение специфического антитела является предиктором развития определенной клинической картины у пациента. Условно можно сказать, что иммуноблот антинуклеарных антител является тестом второго уровня, и целесообразность его использования возникает при обнаружении антинуклеарных антител посредством проведения тестов на выявление антинуклеарного фактора и антител к экстрагируемому ядерному антигену (ЭНА). Если данные тесты обеспечивают высокую чувствительность для выявления антинуклеарных антител, то иммуноблот характеризуется высокой специфичностью для отдельных аутоиммунных заболеваний. Следует заметить, что на данный момент обнаружены не все типы антинуклеарных антител и, кроме того, не все известные типы используются в лабораторной диагностике. Таким образом, результат иммуноблота может быть отрицательным, и это не обязательно исключает диагноз аутоиммунный патологии.
Когда назначается
Тест показан для диагностики и дифференциальной диагностики следующих состояний: системная красная волчанка, подострая кожная волчанки и другие разновидности кожной волчанки, смешанное заболевание соединительной ткани, синдром Шегрена и ассоциированные заболевания, диффузная и локализованная склеродермия, CREST синдром, воспалительные миопатии (полимиозит и дерматомиозит), ювенильный хронический артрит, аутоиммунный гепатит, первичный билиарный цирроз и склерозирующий холангит.
Подготовка к анализу
Специальная подготовка не требуется. Рекомендуется забор крови не ранее чем через 4 часа после последнего приема пищи.Не курить в течение 30 минут до исследования.
Интерпретация
Тест является полуколичественным, что означает, что результат для каждого антигена представляется в «крестах», которые отражают концентрацию и аффинность антитела. Антитела к антигену Sm (Smith) являются высоко специфичными для системной красной волчанки. Анти-Sm направлены против 7 белков (B/B’, D1, D2, D3, E, F, G), составляющих ядро малого ядерного рибонуклеопротеина, и их определение входит в критерии СКВ с 1997 года. Антитела к SS-A (Ro52), интерферон-индуцируемому протеину, являются непецифичными и обнаруживаются при многих аутоиммунных заболеваниях. Так, антитела к данному антигену могут быть обнаружены при системной красной волчанке, её кожных формах, ревматоидном артрите, аутоиммунных заболеваниях печени, болезни Шегрена и так далее. Антитела к SS-A (Ro60) являются значительно более специфичными и отмечаются при классической системной красной волчанке, изолированно при кожной форме системной красной волчанке, а также являются основным показателем болезнь Шегрена. При обнаружении данного антитела у беременной, страдающей волчанкой, риск врожденной красной волчанки у её ребенка значительно повышается. Антитела к SS-B наиболее характерны для синдрома Шегрена (в этом случае типично обнаружение совместно с SS-A), а также для системной красной волчанки. PCNA-антитела обнаруживаются при системной красной волчанки с повышенным риском волчаночного нефрита. Антитела к рибосомам (Ribo P) обнаруживаются при системной красной волчанки в случае повышенного риска вовлечения центральной нервной системы. Антител к нуклеосомам наиболее значительно коррелирует с системной красной волчанкой с картиной волчаночного гломерулонефрита. Антитела к двуспиральной ДНК является маркером системной красной волчанки, внесённым в критерии ее диагностики с 1997 года. Антитела к snRNP/Sm являются неспецифическими и могут свидетельствовать как о смешанном заболевании соединительной ткани, так и о склеродермии или системной красной волчанке с низким риском почечного вовлечения. Антитела к гистонам характерны для лекарственной волчанки, склеродермии. Повышение титра антител к Scl-70 свидетельствует о системном склерозе с диффузным поражением кожи и внутренних органов. Выработка антител к PM-Scl достаточно специфично свидетельствует в пользу склеродермии, сопровождающейся полимиозитом. Обнаружение антител к антигену CENT-B свидетельствует о развитии CREST-синдрома, сопровождающегося склеродактилией, телеангиоэктазией, подкожными кальцинатами, синдромом Рейно и эзофагитом. Синтез антител к Jo-1 характерен для полимиозита в виде антисинтетазного синдрома. Антитела к AMA-M2 могут встречаться при первичном билиарном циррозе или синдроме Шегрена.