Антинуклеарный фактор положительный что это означает
Антинуклеарный фактор
Описание исследования
Наличие антинуклеарных антител является индикатором системных заболеваний соединительной ткани. С помощью данного исследования проводится диагностика аутоиммунных заболеваний.
Системные ревматические заболевания (системная красная волчанка в т.ч.) сопровождаются реакцией иммунной системы организма против соединений нуклеиновых кислот и белков (нуклепротеиновых антигенов), образующихся в результате апоптоза клеток эпителия (последовательности реакций, заложенных в генетическом коде, при которых происходит удаление поврежденных или неполноценных клеток). Образовавшиеся комплексы имеют сходство с чужеродными вирусными частицами, чем и объясняется развитие иммунного ответа. При ускорении процесса апоптоза под влиянием внешних факторов (это могут быть УФО, вирусные инфекции, лекарственные средства) с одновременным сбоем удаления его продуктов происходит запуск аутоиммунных процессов. При этом мишенями для аутоантител становятся апоптотические тельца, в которых конденсируются нуклепротеиновые антигены.
На сегодняшний день сделано описание более 200 видов антител к нуклепротеинам и рибонуклеиновым кислотам. Им дано общее название «антинуклеарные антитела». Аутоантитела не всегда являются токсичными для клеток организма при аутоиммунных заболеваниях. Однако у иммунных комплексов есть способность запуска иммунологического воспаления. Наибольшую опасность этот процесс представляет для тонких сосудов, расположенных в коже, синовиальной оболочке, почках, центральной нервной системе, плевре.
Посредством исследования антинуклеарного фактора (основного метода тестирования антиядерных антител) проводится выявление аутоантител к:
Обнаружение аутоантител в данном исследовании возможно благодаря их связыванию с внутриклеточными антигенами перевиваемой линии клеток эпителия человека (HEp-2), в ядре и внутреннем содержимом которых имеются все характерные для клеток человека антигены. Таким образом, данный тест позволяет единовременно выявить все основные аутоантитела.
Положительный результат теста на АНФ на клеточной линии НЕр2 является маркером многих аутоиммунных заболеваний, в т.ч. системной красной волчанки и системных ревматических заболеваний. Это позволяет использовать данный показатель для обнаружения большинства иммунных заболеваний. При диффузных заболеваниях соединительной ткани (системной красной волчанке и ее кожных формах, разных видах склеродермии, смешанном заболевании соединительной ткани, синдроме Шегрена) положительный ответ теста был обнаружен более чем у 90% обследуемых. Исследование АНФ дает возможность также диагностировать ювенильный ревматоидный артрит и аутоиммунные поражения печени. Кроме того, присутствие антинуклеарных антител отмечается при многих других заболеваниях, как аутоиммунного (например, диабет, тиреоидит), так и инфекционного (вирусный гепатит), онкологического и воспалительного характера. У людей без каких либо симптомов заболевания антинуклеарный фактор присутствует в 1-3% случаев (для людей в возрасте от 65 лет этот показатель несколько выше). Повышенный титр АНФ говорит о повышенной вероятности развития аутоиммунных заболеваний.
Подготовка к исследованию
Материал для анализа рекомендуется сдавать утром натощак, после 8-12 часового ночного перерыва между приемами пищи. Можно пить негазированную воду, от кофе, чая соков следует воздержаться.
Забор крови не проводится сразу после массажа, физиопроцедур, флюорографии, кольпоскопии, гастроскопии, биопсии, рентгеновского, мануального, инструментального, ректального, ультразвукового исследования, других терапевтических и/или диагностических манипуляций.
Показания к исследованию
Тестирование предназначено для выявления факта аутоиммунного поражения соединительной ткани.
Интерпретация исследования
Результат обследования описывается расчетным показателем – коэффициентом позитивности (КП):
КП = оптическая плотность конкретной пробы/пороговое значение
Универсальность коэффициента позитивности позволяет применять его при проведении всех иммуноферментных исследований. Данная величина отражает, насколько позитивен конкретный показатель анализа. Он дает возможность врачам более точно истолковывать полученные данные.
Положительный ответ может являться признаком повышенной вероятности аутоиммунного поражения соединительной ткани. При этом важно знать, что получение положительного результата не является однозначным подтверждением наличия патологии, т.к. антинуклеарные тела обнаруживаются приблизительно у 1-3% здоровых людей, у 10-67% лиц в возрасте от 60 лет. И наоборот, могут отсутствовать приблизительно у 5% лиц с системной красной волчанкой (АНФ-отрицательная СКВ).
Отрицательный ответ говорит о невысокой вероятности наличия системных аутоиммунных заболеваний.
Сомнительным считается результат, близкий к предельному значению. Он может быть получен при низком уровне антител или ложноположительной нетипичной реакции. При получении такого результата необходимо через одну-две недели повторно провести исследование крови, чтобы наблюдать в динамике изменение показателей.
Результат теста выдается на бланке лаборатории медицинской компании «Наука». Пример по данному анализу представлен ниже:
Ф.И.О.: Иванов Сидор Петрович Пол: м Дата рождения: хх.хх.хххх
Дата исследования: хх.хх.хххх
Антинуклеарный фактор на клеточной линии HEp-2 (АНФ)
Описание
Антинуклеарный фактор на клеточной линии HEp-2 (АНФ) — это тест для выявления антинуклеарных антител методом непрямой иммунофлюоресценции.
При системной красной волчанке (СКВ) и других системных ревматических заболеваниях, иммунный ответ направлен против нуклеопротеиновых антигенов, т.е. комплексов нуклеиновых кислот и белков. Эти эндогенные нуклеопротеиновые комплексы образуются в ходе процесса апоптоза эпителиоцитов и напоминают чужеродные вирусные частицы. Ускорение процессов апоптоза под действием ультрафиолетового облучения, вирусных инфекций и лекарственных препаратов, запускает аутоиммунные ответы при СКВ. При апоптозе основные антигены антител конденсируются в апоптотических тельцах, которые становятся мишенью для аутоантител. В настоящее время описаны около 200 разновидностей антител к нуклеопротеинам и рибонуклеиновым кислотам, которые получили название антинуклеарные антитела. При аутоиммунных заболеваниях аутоантитела к ядерным антигенам не обладают прямым цитотоксическим действием на клетки человека, однако иммунные комплексы способны запускать иммунологическое воспаление особенно в местах, где сосуды особенно тонки, в том числе в почках, коже, ЦНС, синовиальной оболочке суставов, плевре.
Исследование антинуклеарного фактора (АНФ) представляет собой основной метод выявления антинуклеарных антител, позволяя выявлять аутоантитела к нуклеиновым кислотам (дсДНК, осДНК, РНК), рибонуклеопротеинам, а также большинству конформационных и нерастворимых антигенов.
Антинуклеарные антитела обнаруживаются благодаря их связыванию с внутриклеточными антигенами перевиваемой линии клеток эпителия человека (HEp-2). Ядро и цитоплазма клеток НЕр-2 содержит все антигены, характерные для человеческого организма, что позволяет выявлять в одном тесте все основные антинуклеарные антитела. Метод непрямой иммунофлюоресценции на клеточной линии НЕр2 рекомендован в качестве золотого стандарта выявления антинуклеарных антител ведущими европейскими (EASIgroup2010) и американскими экспертами (ACRANATaskforce2008). В силу многообразия антигенов антинуклеарных антител, не все они могут быть очищены или синтезированы для использования в иммуноферментных тестах по выявлению антинуклеарных антител.
Позитивность по АНФ на клеточной линии НЕр-2 отмечается при системной красной волчанке (СКВ), системных ревматических заболеваниях и многих аутоиммунных заболеваниях, что делает его универсальным тестом в обследовании больных с аутоиммунной патологией. Положительный результат АНФ отмечается более чем у 90% больных с диффузными болезнями соединительной ткани, такими как системная красная волчанка и кожные формы этого заболевания, склеродермия и ее разновидности, смешанное заболевание соединительной ткани, синдром Шегрена. Выявление АНФ имеет большое значение в диагностике ювенильного ревматоидного артрита и аутоиммунных заболеваний печени. Представители этого семейства аутоантител могут быть обнаружены при множестве других аутоиммунных (тиреоидит, диабет), инфекционных (вирусный гепатит), воспалительных и онкологических заболеваний. Встречаемость АНФ достигает 1–3% у клинически здоровых людей и несколько возрастает у лиц старше 65 лет. Лица с высокими титрами АНФ имеют повышенный риск развития аутоиммунных заболеваний.
Интерпретация результатов
Единицы измерения: титр.
Антинуклеарный фактор положительный что это означает
Получить результаты
Компания «Новые Медицинские Технологии»
Диагностика аутоиммунных заболеваний и синдромов
Показания к назначению анализа: диагностика и дифференциальная диагностика системных заболеваний соединительной ткани (особенно СКВ), аутоиммунного гепатита, вирусного гепатита с аутоиммунным компонентом (индуцированным вирусами или лечебными вмешательствами), первичного билиарного цирроза, рассеянного склероза; выявление аутоиммунного компонента при различных заболеваниях, в патогенезе которых может играть роль аутоагрессия. Материал для исследования: сыворотка крови.
Для определения антинуклеарных антител используется методика непрямой иммунофлюоресценции с использованием в качестве субстрата клеток культивируемой линии Нер-2.
Использование в качестве субстрата клеток злокачественной культивируемой линии благодаря их особенностям (высокое ядерно-цитоплазматическое соотношение, крупные размеры, наличие большого количества митозов) позволяет оценить различные типы свечения, характерные для присутствия в образце крови широкого спектра антител к различным антигенам, имеющих различные клинические ассоциации.
Следует иметь в виду, что часть из определяемых типов свечения является высокоспецифичной, четко ассоциирована с определенными заболеваниями и имеет вполне определенную диагностическую значимость, в особенности при выявлении в высоких титрах; однако некоторые антитела к различным антигенам могут давать сходные типы свечения, в таких случаях может требоваться дальнейшее обследование для уточнения конкретного антигена, к которому направлены аутоантитела. С другой стороны, определенный тип антител может встречаться при нескольких нозологических формах. Существуют также антитела (они встречаются редко), реагирующие исключительно с компонентами веретенного аппарата клеток; обычно они не связаны с аутоиммунными заболеваниями, и их обнаружение расценивается как ложнопозитивный, не имеющий клинических ассоциаций результат.
Все вышеперечисленные особенности обязательно отражаются в лабораторном заключении, где, помимо указания типа свечения и соответствующего ему наиболее вероятного типа антител, даются также рекомендации по трактовке результатов в смысле возможной ассоциации с конкретными нозоформами или синдромами, а также необходимые дополнительные лабораторные исследования.
ТРАКТОВКА РЕЗУЛЬТАТОВ.
У здоровых лиц моложе 60 лет следует ожидать отрицательных результатов на антитела к компонентам ядра и цитоплазмы; в низком титре (слабоположительный результат) эти антитела все же обнаруживаются у 2-3% (по некоторым данным, до 10%) практически здоровых людей, однако никогда нельзя предсказать, не разовьется ли у этих людей аутоиммунное заболевание в будущем (так, по данным некоторых авторов, антитела к ДНК начинают выявляться задолго до начала клинических проявлений СКВ, латентный период может продолжаться годами). После 60 лет частота слабоположительных результатов с возрастом постоянно растет. Клиническая значимость этих результатов остается неясной; как правило, они выявляются только в первичном (скрининговом) разведении 1:40. Исходя из этого, при выявлении положительного результата в скрининговом титре 1:40 всегда необходимо титрование, как минимум до диагностического титра 1:80. В любом случае представляется целесообразным последующее регулярное клинико-лабораторное наблюдение лиц, у которых выявлены ANA в низком титре.
ОГРАНИЧЕНИЯ МЕТОДА Положительный результат предполагает наличие определенных заболеваний (см. ниже), однако, как и результат любых лабораторных исследований, может нуждаться в подтверждении или уточнении с помощью других методов, а также в установлении клинико-лабораторных корреляций.
Надо иметь в виду, что различные лекарственные препараты могут вызывать образование аутоантител (гидралазин, прокаинамид, фенитоин, карбамазепин, изониазид, хлорпромазин, пеницилламин, леводофа, пенициллин, фенилбутазон, пероральные контрацептивы, хинидин). Наиболее частыми мишенями для этих ятрогенных аутоантител являются ядерные гистоны, что приводит к развитию гомогенного или гомогенного периферического типа свечения.
ЗАБОЛЕВАНИЯ, ПРИ КОТОРЫХ ЧАЩЕ ВСЕГО ВЫЯВЛЯЮТСЯ
АНА ИЛИ АНТИЦИТОПЛАЗМАТИЧЕСКИЕ АНТИТЕЛА
— системная красная волчанка (СКВ),
— ревматоидный артрит,
— синдром Шегрена,
— склеродермия,
— дерматомиозит,
— узелковый периартериит и др.;
Антинуклеарные антитела также могут выявляться при острых и хронических лейкозах, приобретенной гемолитической анемии, болезни Вальденстрема, малярии, хронической почечной недостаточности, тромбоцитопениях, лимфопролиферативных заболеваниях, миастении и тимомах.
Антинуклеарные антитела
Что такое «Антинуклеарные антитела»?
Антинуклеарные антитела (АНА) — это группа аутоантител (антител к своим собственным тканям), которые реагируют с компонентами ядер клеток. Известно более 100 видов этих антиядерных антител, по структуре они относятся к белкам класса иммуноглобулинов: IgG, IgM, IgA.
Антитела вырабатываются к нуклеиновым кислотам и различным растворимым белковым компонентам ядра: гистонам, мембране ядра, сплайсосомам, ядрышкам, центромерам и рибонуклеопротеинам.
Заболевания, при которых иммунная система реагирует на свои белки, как на чужеродные, называются аутоиммунными патологиями. Тест на антиядерные антитела назначается для их диагностики. АНА находят более, чем у 90% больных системной красной волчанкой, рассеянным склерозом, аутоиммунным гепатитом, аутоиммунным панкреатитом, первичным билиарным циррозом и другими системными заболеваниями соединительной ткани.
Большинство антинуклеарных антител образуются в ответ на разрушение клеток, когда компоненты ядер становятся доступными для распознавания иммунной системой. В норме этого не происходит, так как иммунные клетки (макрофаги) уничтожают только разрушенные клетки и не передают информацию о них лимфоцитам.
Соединение «антитело и антиген» (компонент ядра) называется иммунным комплексом. Эти комплексы откладываются в стенках сосудов и тканях органов (кожа, почки, мозг, суставные поверхности и др.), что вызывает воспалительную реакцию и повреждение тканей.
В некоторых случаях антинуклеарные антитела образуются при разрушении клеток из-за другой болезни (опухоли, инфекции) или под действием ряда лекарственных препаратов. Но обычно количество таких антител низкое и они не долго циркулируют в крови.
Как подготовиться к анализу
Для исследования на АНА нужна венозная кровь.
Правила подготовки к исследованию:
Показания для назначения анализа
Рекомендовать анализ АНА врач может при:
Значение результатов анализа
Тест на антинуклеарные антитела проводится в виде:
При скрининговом исследовании положительный результат говорит о наличии у пациента какого-то заболевания соединительной ткани. Этот тест проводится при первичном обращении пациента. При отрицательном результате полностью исключить аутоиммунный процесс невозможно.
Иммуноблотинг показывает, какие виды антител преобладают, их сочетания. Такое исследование крови более сложное и дорогостоящее, но оно помогает точнее установить причину роста АНА в крови.
О чем говорит появление антинуклеарных антител в организме
Наличие антинуклеарных антител указывает на развитие в организме аутоиммунных патологий:
Менее выраженное повышение антинуклеарных антител характерно для:
Антинуклеарный фактор положительный что это означает
Метод исследования с использованием человеческих эпителиальных клеток HEp-2, который позволяет обнаружить антинуклеарные антитела – один из маркеров системных заболеваний соединительной ткани.
АНФ, антиядерные антитела, антинуклеарные антитела (АНА).
Antinuclear Antibodies (ANA), Hep-2 Substrate, ANA-Hep2, Fluorescent AntiNuclear Antibody detection (FANA).
Непрямая реакция иммунофлюоресценции.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Как правильно подготовиться к исследованию?
Не курить в течение 30 минут до исследования.
Общая информация об исследовании
Определение антинуклеарного фактора (АНФ) является «золотым стандартом» выявления антинуклеарных антител (АНА) и диагностики аутоиммунных заболеваний.
Патогенез системных заболеваний соединительной ткани (СЗСТ) тесно связан с нарушениями в иммунной системе и повышенной выработкой антител к структурам собственных клеток. Аутоантитела к компонентам ядра клеток – антинуклеарные антитела – взаимодействуют с нуклеиновыми кислотами и белками ядра, антигенами цитоплазмы, что проявляется воспалительными изменениями в тканях и органах, болями в суставах и мышцах, выраженным утомлением, потерей веса, кожными изменениями. АНА обнаруживаются при многих аутоиммунных заболеваниях, но наиболее характерны для системной красной волчанки (СКВ). АНА встречаются более чем у 90 % больных системными заболеваниями соединительной ткани, в настоящее время описано около 200 разновидностей, которые объединены единым названием – антинуклеарный фактор.
При определении АНФ методом непрямой флюоресценции чаще используется перевиваемая линия эпителиальных клеток аденокарциномы гортани человека НЕр-2. Клетки НЕр-2 являются очень удобным субстратом для лабораторного исследования, так как обладают крупными ядрами и на стеклах растут в один слой. АНА выявляются при связывании с внутриклеточными антигенами клеток НЕр-2.
При исследовании эпителиальные клетки НЕр-2 выращивают на стеклах, фиксируют и инкубируют с разведенной сывороткой крови пациента. После удаления избытка сыворотки клетки инкубируют с меченными флюоресцеином антителами, затем снова промывают и исследуют с помощью флюоресцентного микроскопа. При этом определяется титр антител и тип свечения. Диагностически значимым считается титр более 1:160. При обострении ревматических заболеваний он превышает 1:640, а в период ремиссии снижается до 1:160-1:320. Чем больше антител, тем выше титр. По типу свечения можно установить мишени антинуклеарных антител, что имеет важное клиническое значение и определяет тактику дальнейшего обследования пациента. Основными являются периферический, гранулярный (мелко-/крупно-), ядрышковый, центромерный и цитоплазматический типы окрашивания ядра. Каждому типу свечения присущи очень характерные признаки, которые позволяют отличить один вариант от другого.
Гомогенное (диффузное) окрашивание связано с наличием антител к двуспиральной ДНК, гистонам и характерно для СКВ и лекарственной волчанки.
Периферическое свечение обусловлено периферическим распределением хроматина в ядре, связано с антителами к ДНК и специфично для СКВ. Данный тип свечения важно дифференцировать от окрашивания ядерной мембраны, которое происходит при аутоиммунных заболеваниях печени.
Гранулярное (крапчатое, сетчатое) окрашивание встречается наиболее часто и является наименее специфичным, выявляется при многих аутоиммунных заболеваниях. Аутоантигенами в данном случае выступают нуклеопротеиновые комплексы в ядре (Sm, U1-RNP, SS-A, SS-B антигены и PCNA).
Очень высокие титры АНФ с крупногранулярным типом свечения часто указывают на смешанное заболевание соединительной ткани.
Нуклеарное (ядрышковое) окрашивание обусловлено антителообразованием к компонентам ядрышка (PHК-полимераза-1, NOR, U3RNP, PM/Scl), выявляется при склеродермии, болезни Шегрена. АНА иногда повышаются при эндокринных заболеваниях (сахарном диабете 1-го типа, тиреоидите, тиреотоксикозе, полиэндокринном синдроме), кожных заболеваниях (псориазе, пузырчатке), при беременности, после трансплантации органов и тканей, у больных на гемодиализе.
Центромерное свечение появляется при наличии антител к центромерам хромосом и характерно для формы склеродермии – CREST-синдрома.
Цитоплазматический тип свечения связан с антителами к тРНК-синтетазе, в частности к Jo-1, что характерно для дерматомиозита и полимиозита. Данный тип окрашивания также определяется при наличии антител к другим компонентам цитоплазмы при аутоиммунном гепатите, первичном билиарном циррозе.
Одновременное выявление различных типов свечения указывает на присутствие разных видов антител.
У здоровых людей может быть обнаружено мелкогранулярное свечение при низких, умеренных или высоких титрах АНА, но в норме крупнозернистые или гомогенные типы свечения не должны определяться.
В зависимости от результатов оценки типа свечения разрабатывается дальнейшая тактика лечения пациента и назначаются дополнительные исследования, уточняющие спектр АНА.
Для чего используется исследование?
Когда назначается исследование?
Что означают результаты?
Титр: Причины повышения титра АНФ на HEp-2 клетках:
Тип свечения
Для чего он характерен
Для СКВ, лекарственной волчанки, системной склеродермии, хронического активного гепатита
Для СКВ, синдрома Шегрена, смешанной болезни соединительной ткани, ревматоидного артрита
Для полимиозита/дерматомиозита, склеродермии, синдрома Шегрена, СКВ
Для CREST-синдрома (кальциноза кожи, синдрома Рейно, эзофагеальной дисфункции, склеродактилии, телеангиоэктазии)
Для дерматомиозита/полимиозита, аутоиммунного заболевания печени, первичного билиарного цирроза
Что может влиять на результат?
Кто назначает исследование?