Widal test что это

ВИДАЛЯ РЕАКЦИЯ

ВИДАЛЯ РЕАКЦИЯ (F. Widal, франц. инфекционист и интернист, 1862—1929) — диагностическая реакция агглютинации при брюшном тифе и других сальмонеллезах. Предложена в 1896 г. Ф. Видалем. Первоначальная методика В. р. была несложной: один объем испытуемой сыворотки смешивали с девятью объемами бульонной культуры брюшнотифозных бактерий. Результаты учитывали через 2 и 24 часа. При положительной реакции в пробирке с испытуемой сывороткой образовывался осадок и бульон просветлялся. В контрольных пробирках (с сывороткой здорового человека и без сыворотки) бульон оставался равномерно мутным. В дальнейшем методика В. р. была усовершенствована, что дало возможность определять количество агглютининов (титр) в испытуемой сыворотке (титр — максимальное раз-ведение, при к-ром происходит реакция агглютинации). Полученную из крови больного сыворотку можно использовать тотчас или сохранять в рефрижераторе. Постановка реакции заключается в следующем: сыворотку разводят изотоническим раствором хлорида натрия в геометрической прогрессии (1 : 20; 1 : 40; 1 : 80 и т. д. или 1 : 50; 1 : 100; 1 : 200 и т. д.). В качестве антигенов употребляют стандартные тифо-паратифозные диагностикумы (см.), которые дают более однородные результаты, чем живые культуры. Соответственно антигенной структуре возбудителя брюшного тифа в сыворотке больного могут присутствовать О-, Н-, Vi-агглютинины. Vi-агглютинины появляются в сыворотке больного нерегулярно и в невысоких титрах, в связи с чем В. р. с Vi-антигеном для диагностики не используют. Диагностическое значение имеют О- и Н-агглютинины. Для их обнаружения пользуются соответствующими диагностикумами (Н-диагностикум — культура, убитая формалином, О-диагностикум — культура, убитая спиртом или кипячением). Результаты Н-агглютинации учитывают после 2-часового пребывания в термостате; О-агглютинация учитывается после 2-часового пребывания в термостате и 18—20 часов при комнатной температуре.

В связи с антигенной близостью различных представителей рода сальмонелл нередко могут возникать групповые реакции. Для выявления в сыворотке больного специфических агглютининов к различным видам сальмонелл рекомендуют использовать для постановки В. р. более широкий набор диагностикумов [О-диагностикумы из сальмонелл, принадлежащих к следующим группам: группа А — S. paratyphi А; группа В — S. paratyphi В; группа С — S. potsdam; группа D — S, typhi, S. enteritidis (jena); Н-диагностикумы из следующих культур: b — S. paratyphi В; С — S. paratyphi С; d — S. typhi, i — S. typhimurium; g, m — S. enteritidis (jena); 1,5—S. choleraesuis, var. kunzendorf].

Простота постановки B. р. обусловила широкое использование этой реакции для диагностики тифо-паратифозных заболеваний. Однако с течением времени были накоплены наблюдения, показавшие, что диагностическая ценность этой реакции относительна. Положительная В. р. может быть следствием ранее перенесенного заболевания (анамнестическая В. р.) или профилактической вакцинации (прививочная В. р.). При инфекционных заболеваниях различной этиологии (грипп, малярия, туберкулез и пр.) у ранее переболевших или привитых могут появляться агглютинины к бактериям тифо-паратифозной группы, но их титры не достигают высокого уровня, и они быстро исчезают. Положительная В. р. у лиц неболевших и непрививавшихся может быть обусловлена так наз. нормальными антителами. Однако их титр обычно невысок (ниже 1 : 50), но может быть несколько выше в местностях, эндемичных по тифо-паратифозным заболеваниям.

Агглютинины в крови больных обнаруживают с конца первой недели заболевания. Первыми появляются О-, а затем Н-агглютинины. Титр антител постепенно повышается до конца заболевания и даже в первое время реконвалесценции. Затем наступает постепенное снижение содержания агглютининов, которые исчезают через 4—6 мес. после выздоровления, но в отдельных случаях могут быть обнаружены и через 12 мес.

Основное диагностическое значение имеет В. р. с О-антигеном. Диагностическим титром этой реакции считают разведение 1 : 200. Агглютинация только с H-антигеном наблюдается при анамнестической или прививочной В. р. Диагностическое значение придается не столько высоте титра реакции, сколько нарастанию титра в процессе заболевания. Поэтому даже высокие титры при однократной постановке не дают права на окончательный диагноз. Решающим является наблюдение за динамикой В. р., т. е. повторное исследование сывороток, взятых через 5—7 дней. Результаты повторной реакции дают также возможность исключить анамнестическую и прививочную реакции, при которых не наблюдается повышения титра агглютининов. При тифо-паратифозных заболеваниях титры В. р. могут колебаться в весьма широких пределах.

Модификации В. р., ранее предлагавшиеся с целью упрощения методики ее постановки, более раннего выявления антител и пр. (метод Нобля, постановка реакции с растворами поваренной соли различной концентрации и пр.) потеряли свое значение.

Наряду с обычным методом постановки В. р. для серологического диагноза тифо-паратифозных заболеваний широко пользуются PHГА — реакцией непрямой гемагглютинации (см.). Для ее постановки применяют стабильный эритроцитарный диагностикум, изготовляемый производственными ин-тами. Эти диаг-ностикумы представляют собой специально обработанные эритроциты человека 0-группы, сенсибилизированные очищенными О- и Vi-ан-тигенами из культур тифо-паратифозных бактерий. PHГА зарекомендовала себя как более чувствительный и специфичный метод, позволяющий обнаруживать антитела в более ранние сроки заболевания. Преимуществом этой реакции является также простота ее постановки и возможность более быстрого получения результатов. Диагностическое значение имеет PHГА с О-антигеном. Ее диагностический титр равен разведению 1 : 640, но нередко она дает очень высокие титры. PHГА с Vi-антигеном не имеет диагностического значения при брюшном тифе, т. к. титры Vi-антител, как правило, невысоки.

PHГА с Vi-антигеном нашла применение при обследовании на бактерионосительство. После полного выздоровления Vi-агглютинины быстро исчезают, но у хрон, брюшнотифозных носителей они присутствуют постоянно и легко выявляются при помощи PH ГА с Vi-антигеном. У лиц, содержащих Vi-антитела, бактерионосительство должно быть подтверждено бактериол, методом, т. е. выделением культуры. В весьма редких случаях Vi-антитела у бактерионосителей отсутствуют, что, по-видимому, может быть связано с особенностями антигенной структуры брюшнотифозных бактерий или особенностями иммунологической реактивности носителя.

Библиография: Руководство по микробиологической диагностике инфекционных болезней, под ред. К. И. Матвеева, М., 1973; Kohler W. u. М о с h m a n n H. Grundriss der medizinischen Mikrobiologie, Jena, 1968; W i d a 1 F. Serodiagnostic de la fievre typhoide, Bull. Soc. m6d. Hop. Paris, t. 13, p. 561, 1896; W i 1 d-f ii h r G. Medizinische Mikrobiologie, Im-munologie und Epidemiologie, T. 1—2, Lpz., 1959 —1961, Bibliogr.

Источник

Widal’s test

Смотреть что такое «Widal’s test» в других словарях:

Widal’s test — noun a test for detecting typhoid fever and other salmonella infections • Syn: ↑Widal test • Hypernyms: ↑agglutination test * * * noun or widal test Usage: usually capitalized W Ety … Useful english dictionary

Widal syndrome test (reaction serum test) — Wi·dal syndrome, test (reaction, serum test) (ve dahlґ) [Georges Fernand Isidore Widal, French physician, 1862–1929] see hemolytic anemia, under anemia, and see under test … Medical dictionary

Widal test — also Widal s test n a test for detecting typhoid fever and other salmonella infections using the Widal reaction compare AGGLUTINATION TEST * * * Widal serum test (for typhoid and paratyphoid fevers) a test of serum of patients with suspected… … Medical dictionary

Widal test — The Widal test is a presumptive serological test for Enteric fever or Undulant fever. In case of Salmonella infections, it is a demonstration of agglutinating antibodies against antigens O somatic and H flagellar in the blood. For brucellosis,… … Wikipedia

Widal test — noun a test for detecting typhoid fever and other salmonella infections • Syn: ↑Widal s test • Hypernyms: ↑agglutination test * * * noun see widal s test … Useful english dictionary

Widal reaction — Wi·dal reaction also Wi·dal s reaction vē däl(z) n a specific reaction consisting in agglutination of typhoid bacilli or other salmonellas when mixed with serum from a patient having typhoid fever or other salmonella infection and constituting a… … Medical dictionary

Widal reaction — an agglutination test for the presence of antibodies against the Salmonella organisms that cause typhoid fever. It is thus a method of diagnosing the presence of the disease in a patient and also a means of identifying the organisms in infected… … The new mediacal dictionary

Widal test — (ve dahl ) A test involving agglutination of typhoid bacilli when they are mixed with serum containing typhoid antibodies from an individual having typhoid fever; used to detect the presence of Salmonella typhi and S. paratyphi … Dictionary of microbiology

Источник

Widal Test : Principle, Procedure, Result Interpretation and Limitations

Salmonella typhi and Salmonella paratyphi A, B and C cause enteric fever (typhoid and paratyphoid) in human. Laboratory diagnosis of enteric fever includes Blood culture, Stool Culture and Serological test.

Widal test is a common agglutination test employed in the serological diagnosis of enteric fever. This test was developed by Georges Ferdinand Widal in 1896 and helps to detect presence of salmonella antibodies in a patient’s serum.

Principle of Widal test

Patients infected with Salmonella produce antibodies against the antigens of the organism. Antibodies in serum, produced in response to exposure to Salmonella organisms will agglutinate bacterial suspension which carries homologous antigens. This forms the basis of Widal test.

The organisms causing enteric fever possesses two major antigens namely somatic antigen (O) and a flagellar antigen (H) along with another surface antigen, Vi.

During infection with typhoid or paratyphoid bacilli, antibodies against flagellar antigen of S. typhi (H), S. paratyphi A (AH), S. paratyphi B (BH) and Somatic Antigen of S.typhi (O) usually become detectable in blood, 6 days after the onset of infection.

Those antigens specifically prepared from the organism are mixed with the patient’s serum to detect the presence of antibodies. Positive result is indicated by the presence of agglutination Absence of agglutination indicates a negative result.

The paratyphoid O antigens are not employed as they cross-react with the typhoid O antigen. If agglutination occurs with O antigen then it is considered positive for Salmonella typhi.

If agglutination occurs in A or B antigen then it is confirmed as positive for Salmonella paratyphi. Agglutination will occur in H antigen for all the cases of antigens like O, A, and B.

Preparations of antigens

Antigen suspensions may be prepared from suitable stock cultures in the laboratory. But generally commercially prepared suspensions are used.

Procedure of Widal test

The Widal test can be conducted in two ways :

Tube agglutination has more accuracy as compared to the slide agglutination technique. However, A slide widal test is more popular among diagnostic laboratories as it gives rapid results.

Qualitative Slide Test

Procedure :

Interpretation :

Quantitative Slide Test

This is performed for the samples which showed positive agglutination during qualitative test.

Procedure :

Interpretation :

The antibody titre of the test sample is its highest dilution that gives a visible agglutination. 80 µl corresponds to 1 in 20 dilution, 40 µl to 1 in 40, 20 µl to 1 in 80, 10 µl to 1 in 160 and 5 µl corresponds to 1 in 320 titre. Agglutinin titre greater than 1:80 is considered as significant infection and low titres indicate absence of infection.

Quantitative Tube Test

Procedure :

Interpretaton :

The antibody titre of the test sample is its highest dilution that gives a visible agglutination. Agglutinin titre greater than 1:80 is considered as significant infection and low titres indicate absence of infection.

Источник

Widal Test: Principle, Procedure, Results, Limitation

Last updated on June 21st, 2021

Widal test was devised by Frank Widal in 1896. Widal originally described the test to diagnose Salmonella enterica serotype Paratyphi B infection.

Patients infected with S. enterica serotype Typhi and Paratyphi produce serum antibodies to the O and H antigens of these pathogens, and the detection of these specific antibodies forms the basis of this test, the standardized protocol of which was established in 1950 (Felix, 1950).

Widal test is the most widely used diagnostic test for typhoid fever in developing countries. The Widal test has been in use for more than a century as an aid in the diagnosis of typhoid fever. It measures agglutinating antibody levels against O and H antigens. The Widal test is positive after the tenth day of the disease and may be false positive if an individual previously received a TAB vaccine.

Unfortunately, S. enterica serotype Typhi shares these antigens with other Salmonella serotypes and shares cross-reacting epitopes with other Enterobacteriaceae. The levels are measured by using serial dilutions of sera. Tube agglutination method is the recommended method of performing the Widal test; where serial two-fold dilutions of the subject’s serum from 1:20 to 1:1280 are tested.

After its development, the rapid slide test became the most commonly used technique in local laboratories because of its convenience.

Ideally, the Widal test should be run on both acute and convalescent-phase sera to detect an increase in the agglutination titre but patient management cannot wait for results obtained with a convalescent-phase sample. For practical purposes, a treatment decision must be made on the basis of the results obtained with a single acute-phase sample. It is, therefore, important to establish the antibody level in the normal population in a particular locality in order to determine a threshold above which the antibody titre is considered significant.

In a situation where second sample collection is not feasible, knowledge of the agglutinin levels in the sera of normal subjects from the patients’ community can form the baseline on which a diagnosis can be made. For practical purposes, titres occurring in more than 5% of the subjects under study were not diagnostically significant and should be regarded as normal in that population (Collard et al., 1959).

Widal test is simple and inexpensive, so it has gained widespread use despite shortcomings of both sensitivity and specificity that compromise its utility as a diagnostic test.

Serological response with Widal agglutinins

The earliest serological response in acute typhoid fever is a rise in the titre of the O antibody, with an elevation of the H- antibody titre developing more slowly but persisting longer than that of the O- antibody cutoff titre. Usually, O antibodies appear on days 6-8 and H antibodies on days 10-12 after the onset of the disease. The O antibody concentrations fall about 6 months after previous exposure to typhoid. Patients from communities where typhoid is endemic have higher H-antibody titres than do those not previously exposed to the antigens.

Some authors have reported that the level of H agglutinins is unhelpful in the diagnosis of typhoid, mentioning that the H-agglutinin titre remains elevated for a longer period than the O-agglutinin titre after an episode of typhoid fever and also may rise as a nonspecific response to other infections. Others, however, have proposed that the H-agglutinin titre is as useful as or more useful than the O-agglutinin titre. Some of the studies found O titre to be of greater diagnostic significance.

Although simple to perform, the Widal test is difficult to interpret, requiring detailed knowledge of the patient’s medical, travel and vaccination history. The interpretation of a Widal test is greatly affected by the nature and extent of the patient’s previous contact with typhoid antigens, whether the contact depends on a clinical or subclinical infection with typhoid or related organisms or is from TAB vaccination. The less the degree of the previous contact, the greater the possibility that the findings of a Widal test may be usefully interpreted. In countries where typhoid is endemic and prevalent the test can be interpreted only if the reporting laboratory has information about the basic level of O and H agglutinin in the population. Figure well in excess of the known titres especially if the amount of antibody rises during the illness are highly suggestive of infection.

The value of the Widal test in diagnosing enteric fever in endemic areas remains controversial. Some express the view that the test lacks standardization and adequate sensitivity and specificity to be clinically useful, while others consider the test to have diagnostic value when judged with clinical findings and knowledge of the ‘normal’ O and H agglutinin titres in the local population (‘baseline titres’). The results from a single sample are difficult to interpret because high background rates of circulating antibodies to Salmonella enterica serotype Typhi or other Salmonella serotypes may produce a false-positive result. If paired sera are not available a single serum may be valuable if it yields an antibody concentration significantly in excess of the community norm for the test.

The sensitivity and specificity of the Widal test are known to vary widely, and a specific cutoff value should be established for each specific situation.

Sensitivity and Specificity of Widal test in Different Endemic Countries

Materials required

The Widal agglutination test was performed using standardized suspension of S. enterica serotype Typhi ‘O’ and ‘H’ and S. enterica serotype Paratyphi A ‘H’ and S. enterica serotype Paratyphi B ‘H’ antigen.

Before use, the antigen suspensions were allowed to warm to room temperature and were well-mixed.

Rapid screening test

Slide titration

Reporting Widal test

The Widal test was reported by giving the titre for both O and H antibodies. The titre of each serum was read as the highest serum dilution giving visible agglutination.

The agglutination observed in any circle was indicative of the following results in a test tube.

Quality control

Quality control was done using the positive polyspecific control of the same dilutions as the test sample. Normal saline was used for a negative control.

Significance of Widal test in typhoid endemic and non endemic areas

Epidemiologic studies in an endemic country have shown that at least seven subclinical cases of typhoid fever occur for each clinical case. Therefore a positive Widal test may be seen in apparently healthy persons from an endemic area as a result of previous subclinical infection.

The value of the Widal test in diagnosing enteric fever in endemic areas remains controversial. But is still useful and widely available test in endemic areas. Most of the researchers reported that Widal test has a diagnostic value when judged with clinical findings and knowledge of the baseline O and H agglutinin titres in the local population. Although there was no consensus on the diagnostic titre for a single Widal test, all the studies reported a “positive” Widal test based on a fourfold rise in O agglutinins in repeated tests or a titre of >1:80 or greater in a single test. Some researchers found that the level of H agglutinins is more helpful than the level of O agglutinins.

Study carried out by Punia et al (2003) recommended the baseline titres for anti-O and anti- H for Salmonella enterica serotype Typhi and anti-H for Paratyphi as 160 for anti-O and 320 for anti-H to be diagnostic for enteric fever in Chandigrah India. A study done by Roxas et al (1989) showed O agglutinins of 1:80 in 65% of the apparently normal individuals by the slide agglutination technique. A study by Willke et al (2002) in Turkey; a typhoid endemic country, concluded that O and H agglutinin titres of ≥1:200 are of diagnostic significance.

To curb the overdiagnosis and misdiagnosis of Typhoid fever, Adeleke and Ihesiulor, 2008 recommended a single Widal titre of >1:160 or a four-fold increase in titre between two samples taken at least 10 – 14 days apart, as diagnostic. Acharya T et al reported that; both O and H agglutinin titre >1:160 could be diagnostically significant in the presumptive diagnosis of enteric fever in Nepal.

Elevated levels of both O and H agglutinin titre are more helpful than either of them alone, in making a presumptive diagnosis. When blood cultures are not available or impractical, a single Widal test can still have diagnostic significance, if the results are interpreted with relevant clinical findings and prevailing O and H agglutinin titres in the local population.

Источник

Widal test: Introduction, Principle, Procedure, Result interpretation, Applications and limitations

Widal test: Introduction, Principle, Procedure, Result interpretation, Applications and limitations

Introduction

Principle of Widal test:

Requirements for widal test:

i) Fresh serum, stored at 2-8° Serum should not be heated or inactivated.

ii) The complete kit containing five vials containing stained Salmonella antigen

iii) Widal positive control

iv) Widal test card or slide

v) Applicator stick

Procedure of Widal test:

I. Rapid slide test:

*if agglutination is visible within 1 minute, proceed for quantitative slide test or tube test for the quantitative estimation of the titre of the antibody.

II. Quantitative slide test:

The serum volumes in the quantitative slide test corresponds approximately to the tube test is given below:

III. Quantitative tube test:

4. Add a drop of appropriate widal test antigen to all the test tubes

5. Mix well and incubate at 37°C for 16-20 hours and examine for agglutination.

6. Antibody titre is the highest dilution of serum showing clear agglutination.

Источник