Альфа 2 макроглобулин что показывает
Альфа-2 макроглобулин – особые белки, которые синтезируются печенью. Белок поступает в кровоток, где блокирует активность протеиназ (ферментов, задействованных в формировании иммунных ответов и процессе свертывания крови).
Исследование крови на уровень альфа-2 макроглобулина
Данный тест назначается в ходе диагностирования патологий печени. В частности, его результаты помогают выявить такой патологический процесс, как фиброзирование. Научно доказано, что увеличение количества белка в сыворотке крови по времени совпадает с прогрессированием фиброза и переходом воспаления в активную фазу. Несмотря на это, сегодня в медицинской практике результаты лабораторных исследований рассматриваются только в качестве косвенного признака патологического перерождения печени. Точный диагноз ставится врачом только на основании результатов биопсии. Изменение лабораторных показателей может служить показанием для ее проведения. Если результаты анализа крови на альфа-2 макроглобулин у пациентов с подозрением на фиброз остаются в пределах нормы, это позволяет отказаться от проведения инвазивного исследования, которое несет определенные риски для здоровья.
Норма альфа-2 макроглобулина
Для возраста 1-2 года характерен максимальный уровень этого белка. Норма для детей почти вдвое выше, чем для взрослых. Уровень белка постепенно снижается по мере взросления. У пожилых людей часто наблюдается повышение показателей. Интерпретация результатов выполняется с учетом возраста и пола пациента, а также ряда других факторов.
Показания к исследованию
Данный тест проводится в следующих случаях:
Подготовка к исследованию
Для проведения теста необходимо сдать кровь из вены. Она сдается натощак после 12-ти часовой голодной паузы. В это время можно пить только воду. За полчаса до сдачи крови необходимо отказаться от курения, избегать значительных физических нагрузок и стресса.
Интерпретация результатов анализа
На количество белка могут оказывать влияние различные факторы. Поэтому по его уровню можно только косвенно судить о состоянии печени.
Причиной повышения показателей может быть сахарный диабет (если заболевание протекает в течение длительного времени), прием оральных контрацептивов, доброкачественные и злокачественные новообразования предстательной железы, болезнь Альцгеймера или псориаз. Кроме того, уровень этого белка повышается у беременных женщин.
Снижение концентрации белка может наблюдаться у пациентов, которые находятся на искусственном кровообращении, при развитии ДВС-синдрома или множественной миеломы, патологиях поджелудочной и прочее.
Уровень белка у пациентов с хроническими и острыми патологиями может меняться независимо от конкретного заболевания. Интерпретация результатов выполняется только врачом с учетом данных всех проведенных лабораторных и инструментальных исследований, клинической картины и других факторов. Для точной диагностики во многих случаях требуется комплексное обследование.
АЛЬФА-2 МАКРОГЛОБУЛИН
Альфа-2-макроглобулин (А2М) – один из белков плазмы крови, относящийся к классу гликопротеинов. Является одним из компонентов фракции альфа-2-глобулинов.
В организме он участвует в ингибировании ферментов, выполняет транспортную функцию, принимает участие в процессе свертывания крови и в острых воспалительных реакциях.
Альфа-2-макроглобулин производится в печени, откуда он попадает в кровь. В период беременности, внутриутробного развития, у детей и подростков его концентрация в крови несколько выше, чем у взрослых, а у женщин выше, чем у мужчин, поскольку уровень этого белка является эстрогензависимым.
Анализ крови на содержание альфа-2-макроглобулина важен для диагностики хронических заболеваний печени, таких как вирусные гепатиты, цирроз, алкогольная и неалкогольная жировая болезнь и т.д., поскольку при этих заболеваниях его уровень в крови возрастает. Обычно этот тест используется в комплексе с другими маркерами состояния печени для оценки ее функции и определения риска развития фиброза; также его используют в диагностике патологии почек. Заболевания предстательной железы и сахарный диабет также могут влиять на уровень А2М.
В каких случаях обычно назначают исследование?
Что именно определяется в процессе анализа?
Происходит измерение концентрации альфа-2-макроглобулина в образце сыворотки крови пациента методом иммунотурбидиметрии.
Что означают результаты теста?
Высокие значения А2М наблюдаются при хронических заболеваниях печени и указывают на развитие фиброза – замещения гепатоцитов соединительной тканью. Также повышение уровня белка может быть вызвано снижением объема плазмы крови и относительном увеличении его концентрации по отношению к менее крупным белкам при нефротическом синдроме. Некоторое количество альфа-2-макроглобулина вырабатывается клетками предстательной железы, поэтому его уровень повышается при ее доброкачественных заболеваниях и снижается при развитии рака.
Низкая концентрация белка в крови может быть следствием острого панкреатита, инфаркта миокарда, хирургических операций.
Сроки выполнения теста
Как подготовиться к анализу?
Следует придерживаться общих правил подготовки к взятию крови из вены.
Альфа 2 макроглобулин что показывает
Примерно на десятой неделе внутриутробного развития уровень МГ в сыворотке крови достигает 15% от уровня взрослого и постепенно повышается до нормальных (для взрослого) значений. Максимальный уровень отмечается к 1-3 годам (примерно 4,5 г/л), затем постепенно снижается до стабилизации на уровне, характерном для взрослых к 25 годам. Его концентрация у женщин примерно на 20% выше, чем у мужчин. Средняя концентрация МГ в плазме крови взрослых людей составляет 2,6-3,3 г/л [1; 3; 4].
Согласно современным данным, альфа2-макроглобулин имеет существенное клинико-диагностическое значение. Он является выраженным маркером «острой фазы», концентрация которого тонко реагирует на большинство острых воспалительных заболеваний. Достоверное повышение уровня сывороточного МГ регистрируется при нефротической патологии, а также в случаях раннего отторжения трансплантата. Высокие концентрации белка обнаружены у больных сахарным диабетом, особенно при нарушении функции почек. Снижение уровня МГ регистрируется при вирусном гепатите, остром панкреатите, ревматическом остеоартрозе, на ранних стадиях ожоговой болезни [2; 4; 5; 11].
Ранее нами было отмечено, что средняя концентрация МГ в плазме крови экспоненциально возрастает в течение беременности, достигая максимума в конце ее, что свидетельствует о непосредственном участии в процессе формирования иммунологической толерантности беременности [6; 7].
Кроме того, доказано, что МГ обладает выраженной иммуносупрессивной активностью по отношению к различным звеньям иммунной системы человека. Наиболее сильно выражено иммуносупрессивное действие белка по отношению к лимфоцитам в течение беременности, особенно в первом триместре. Этот белок индуцирует способность макрофагов и нейтрофилов мигрировать в участки воспаления [4; 5; 8-10].
В соответствии с изложенными фактами логично предположить, что МГ является активным компонентом процессов гуморального иммунитета и, следовательно, может выступать в качестве маркера изменений и нарушений иммунного статуса человеческого организма.
Учитывая, что заболевания, сопровождающиеся нарушением иммунитета, составляют обширный пласт современной нозологии, выявление патогенетических звеньев иммунного дисбаланса и разработка новых способов оптимизации качества диагностики подобных патологических состояний путем апробации и внедрения иммунохимического теста на МГ, безусловно, являются актуальной задачей современной медицины.
Цель исследования: количественный иммунохимический анализ сывороточной концентрации МГ при ряде патологических состояний, сопровождающихся изменением иммунного фона, и выявление корреляции количественных показателей с течением патологического процесса.
Материалы и методы исследования
При разработке способа выделения и очистки МГ применяли методы высаливания глобулинов сульфатом аммония 40%-ной насыщенности, центрифугирование при 6000 об/мин, ионообменную хроматографию на DEAE-сефадексе А-50 в ступенчатом восходящем градиенте ионной силы, рабочий буфер 0,01 М трис-HCl, рН 7,2, гель-проникающую хроматографию на Toyopearl-65, рабочий буфер 0,15 М фосфатный, рН 7,4.
Количественный анализ альфа-2-макроглобулина проводили методом ракетного электрофореза в агаровом геле в варианте Laurell C.B. и Merrill D. с использованием моноспецифической самостоятельно полученной тест-системы на этот белок. Определение концентраций МГ в биоматериале проводилось из расчета порога чувствительности разработанных тест-систем.
На основе полученных ранее данных о физико-химических свойствах МГ [6; 7] разработан оригинальный алгоритм выделения и очистки этого белка. Исходным биоматериалом для этого служила сыворотка крови беременных женщин поздних сроков (36-40 недель гестации), которую получали в МУЗ «Клинический родильный дом» г. Астрахани. Способ очистки МГ включал последовательные этапы: высаливание исходного материала сульфатом аммония 40%-ной насыщенности с последующим центрифугированием (6000 g), ионообменную хроматографию на DEAE-сефадексе А-50 (рабочий буфер 0,01 М трис-HCl, рН 7,2) в ступенчатом восходящем градиенте ионной силы, гель-фильтрацию на Toyopearl-65 (рабочий буфер 0,15 М фосфатный, рН 7,4).
Контроль чистоты полученных препаратов осуществляли путем аналитического электрофореза в полиакриламидном геле (рис. 1).
Рис. 1. Анализ чистоты полученного препарата МГ методом электрофореза в ПААГ.
Полученные вышеописанным способом очищенные препараты МГ использовали для получения антисывороток путем иммунизации кроликов породы шиншилла дробными дозами чистого антигена с адъювантом Фрейнда по следующей схеме: инъекция включала смесь антигенного материала с полным адьювантом Фрейнда в соотношении 1:2. Смесь вводилась подкожно в боковую поверхность туловища животного в 8 точек. Инъекции проводились четырежды с недельным интервалом. Забор крови осуществлялся из краевой вены уха животного на 6-10-й день после последнего введения.
Если полученные антисыворотки не являлись моновалентными, то для избавления от балластных антител проводили истощение антисыворотки методом аффинной сорбции с фиксированными антигенами (лиофилизированная плазма донора). Данная методика представляет собой собственную модификацию метода связывания белков с полиакриламидным гелем (Bio Gel P-200) при использовании глутарового альдегида.
Абсолютную чувствительность полученных тест-систем определяли как частное концентрации белка в очищенном препарате, определенного биуретовым методом, и максимального рабочего разведения тест-антигена.
В результате проведенной работы разработаны специфические иммунохимические тест-системы на МГ, в которых тест-антигеном является сыворотка крови беременных женщин поздних сроков (35-40 нед) в рабочем разведении: 1/8, с порогом чувствительности 3,95±0,19 мг/л.
Полученные тест-системы использовали, в частности, для определения уровня МГ методом ракетного электрофореза в агаровом геле в варианте Laurell C.B. и Merrill D. в клиническом материале.
Сравнительный анализ сывороточных концентраций МГ показал значительный разброс средних показателей в различных исследуемых нозологических группах (таблица).
Уровни сывороточного МГ в исследуемых группах
Альфа 2 макроглобулин что показывает
Определение концентрации альфа-2-макроглобулина в сыворотке крови, которое может быть использовано для диагностики фиброза печени.
АМГ (Альфа-2-макроглобулин); α2-макроглобулин; А2М; макроглобулин, альфа-2.
AMG (Alpha-2-Macroglobulin); α2-Macroglobulin; А2М; Macroglobulin, Alpha-2.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Как правильно подготовиться к исследованию?
Общая информация об исследовании
Человеческий альфа-2-макроглобулин (А2М)представляет собой высокомолекулярный гликопротеин плазмы крови, весом 720 кДа, имеющий тетрамерную структуру и большое количество дисульфидных связей. Он является самым большим неглобулиновым белком, одним из основных компонентов фракции альфа-2-глобулинов и облает множеством разнообразных функций. В частности, он участвует в ингибировании различных типов неспецифичных протеиназ плазмы, транспорте цитокинов, ростовых факторов, гормонов, в развитии иммунных и воспалительных реакций, проявляет иммуносупрессивные свойства. Также А2М принимает участие в механизмах ингибирования ферментных каскадов в системе комплемента, калликреин-кининовой системе, системе свертывания крови и фибринолиза.
Синтез А2М происходит в клетках печени, откуда он попадает в кровь, где циркулирует и практически не диффундирует в другие жидкости из-за своих больших размеров. Достоверные повышения уровня А2М отмечаются в период эмбриогенеза, во время беременности, у детей, а также во все периоды жизни человека, характеризующиеся активным ростом, развитием и дифференциацией. Следует отметить, что А2М является эстрогензависимым белком, поэтому его средний уровень несколько повышен у женщин репродуктивного возраста, по сравнению с мужчинами. У детей его уровень в среднем вдвое выше, чем у взрослых, и снижается до взрослого уровня в подростковом возрасте.
Уровень А2М в сыворотке крови является важным диагностическим маркером фиброза печени, возникающего вследствие хронических заболеваний печени. К ним относятся вирусные гепатиты В и С, неалкогольная жировая болезнь, алкогольное поражение печени, и, как следствие, формирование цирроза печени. Важно отметить, что уровни А2М отражают активность фиброза печени, что имеет значение при определении стадии заболевания, а также при назначении патогенетической терапии. «Золотым» стандартом диагностики фиброза печени является проведение биопсии печени с последующим морфологическим изучением биоптата. Данная процедура является высокоинформативной, но имеет ряд недостатков: возможность получения ложноотрицательных результатов, инвазивность метода и развитие осложнений после проведения процедуры. Поэтому определение А2М наряду с другими биохимическими показателями поражения печени может быть рекомендовано как информативный, неинвазивный способ оценки степени активности фиброза печени.
Повышенные уровни А2М также отмечаются при длительном течении сахарного диабета, нефротическом синдроме. При нефротическом синдроме повышение уровня А2М происходит вследствие снижения объема плазмы, снижения онкотического давления плазмы из-за потери более низкомолекулярных белков с мочой и незначительного выведения самого А2М с мочой. Следует также отметить, что А2М вырабатывается клетками предстательной железы, что приводит к возможности повышения его значений при доброкачественной гиперплазии предстательной железы и снижения при длительном активном онкологическом процессе в данном органе.
Понижение уровня А2М отмечается при остром панкреатите, после операций, сопровождающихся массивной кровопотерей, при септицемии. У пациентов, перенесших острый инфаркт миокарда, имеющих низкий уровень А2М, отмечается статистически более благоприятный прогноз после выживаемости более одного года.
При определении белковых фракций при электрофорезе белков сыворотки крови следует отмечать повышение альфа2-фракции, в состав которой входит А2М. Одним из современных и высокочувствительных методов диагностики белков сыворотки крови является иммунотурбидиметрический метод. Он позволяет точно определить концентрацию белка по изменению мутности раствора в результате реакции антиген-антитело и используется при невозможности определения содержания белка по его ферментативной активности.
Для чего используется исследование?
Когда назначается исследование?
Белковые фракции, общий белок
Что такое белковые фракции (Serum Protein Electrophoresis, SPE)?
Общий белок сыворотки крови состоит из смеси белков с разной структурой и функциями. Разделение на фракции основано на разной подвижности белков под действием электрического поля. Обычно методом электрофореза выделяют несколько стандартных фракций:
Фракция альбуминов в норме составляет 40-60% от общего количества белка. Альбумин – основной белок плазмы крови. Альбумин плазмы быстро обновляется. В течение суток синтезируется и распадается 10-16 г белка этой фракции. Синтез альбумина происходит в печени, зависит от доступа аминокислот и, следовательно, скорость синтеза снижается в период белковой недостаточности.
Основные функции альбумина:
поддержание коллоидно-осмотического (онкотического) давления плазмы и объема циркулирующей крови;
транспортная функция: связываясь с билирубином, холестерином, желчными кислотами, ионами металлов (в частности с кальцием), гормонами (тироксином, трийодтиронином, кортизолом, альдостероном), свободными жирными кислотами и лекарствами, поступающими в организм извне (антибиотиками, салицилатами). Таким образом альбумин участвует в минеральном, пигментном, гормональном и некоторых других видах обмена, регулируя содержание свободных (не связанных с белком фракций) биологически важных веществ, обладающих более высокой активностью. Благодаря этой функции, альбумин играет значительную роль в осуществлении процессов детоксикации организма.
Фракция альфа1-глобулина включает в себя острофазные белки:
К глобулинам относятся транспортные белки:
Фракция альфа2-глобулинов преимущественно включает острофазные белки:
Альфа-липопротеиды участвуют в транспорте липидов.
Фракция бета-глобулинов содержит:
Фракция гамма-глобулинов состоит из:
Показания к назначению анализа:
Когда значения повышены?
Альбумин:
Фракция альфа1- глобулина(повышение альфа1-антитрипсина):
Фракция альфа2-глобулина:
повышение гаптоглобина (воспаление, злокачественные опухоли, некроз тканей).
Фракция бета-глобулина:
Фракция гамма-глобулина:
Когда значения понижены?
Альбумин:
Фракция альфа1- глобулина(повышение альфа1-антитрипсина):
Фракция альфа2-глобулина:
Фракция гамма-глобулина: